Estado actual del diagnóstico del Paludismo: Experiencia del Laboratorio de Referencia del Centro Nacional de Microbiología

Agustín Benito, José Miguel Rubio, Aída de Lucio

Laboratorio de Referencia de Paludismo. Servicio de Parasitología Centro Nacional de Microbiología Instituto de Salud Carlos III Centro Nacional de Medicina Tropical Instituto de Salud Carlos III

 

RESUMEN
Una de las funciones del Laboratorio de Referencia de Paludismo del Centro Nacional de Microbiología es la de desarrollar herramientas diagnósticas nuevas que faciliten la labor en la realización de la vigilancia de paludismos importados además de facilitar el diagnóstico y/o confirmación de aquellos casos sospechosos procedentes del Sistema Nacional de Salud y en concreto de las Comunidades Autónomas. Además, desde 1997 hasta la actualidad se han realizado estudios comparativos con las principales pruebas de diagnóstico rápido existentes en el mercado. En el presente artículo se hace una revisión sobre el estado actual de los métodos diagnósticos de paludismo bajo la visión propia que da la experiencia como laboratorio de referencia, dando a la vez ciertas pautas interesantes sobre los distintos métodos diagnósticos a usar: a) métodos de diagnóstico directo (microscopía en gota gruesa y extensión teñidas con colorante de Romanowsky, microscopía óptica de fluorescencia, pruebas rápidas de diagnóstico basadas en captura antigénica o en detección de actividad enzimática y finalmente el uso de técnicas de amplificación de ADN ya sea nested o multiplex PCR o PCR en tiempo real); b) además se valoran los métodos indirectos basados en pruebas serológicas convencionales. En el Laboratorio de Referencia de Paludismo del Centro Nacional de Microbiología se han detectado una media de 200 casos anuales (diagnóstico y/o confirmación) desde el segundo semestre de 1997 hasta la actualidad y gracias al uso de la multiplex-PCR se han podido detectar dos paludismos inducidos (transfusionales), dos casos de paludismo congénito, cinco casos de detección de posibles donantes de riesgo que fueron descartados y el primer caso de transmisión local de Plasmodium ovale conocido en una paciente de 75 años de edad de la localidad de Alcalá de Henares en Madrid.

 

ABSTRACT
One of the functions of the Reference Malaria Laboratory of the National Center of Microbiology is to develop new diagnostic tools that facilitate the work in the accomplishment of the surveillance of imported malaria besides facilitating diagnosis and /or confirmation of the suspicious cases coming from the National Health System and in concrete of the Autonomous Communities. In addition, from 1997 to present several studies have been conducted comparing the main comercial fast diagnosis tests. The present article revises the present status of the malaria diagnostic methods from the experience gained as the reference laboratory, giving also some interesting guidelines on the use of the different diagnostic methods: a) methods of direct diagnosis of thick smear and Romanowsky dyed optical microscopy of fluorescence, fast diagnostic tests based on antigenic capture or on detection of enzymatic activity and finally techniques of DNA amplification nested or multiplex PCR or RT-PCR (realtime-PCR); b) indirect methods based on conventional serology tests. In the Malaria Reference Laboratory of the National Center of Microbiology an average of 200 cases per year (diagnosis and/or confirmation) have been detected from the second semester of 1997 to present. Thanks to the use of the multiplex-PCR it has been possible to detect two transfusional malaria cases, two cases of congenital malaria, five cases of possible risk donors who were discarded, and the first known case of local transmission of Plasmodium ovale in a patient of 75 years of age from Alcala de Henares in Madrid.