Caracterización molecular de Galba truncatula, vector principal de la Fascioliasis, en Argentina. Implicaciones en salud pública

Molecular characterisation of Galba truncatula, main vector of fascioliasis, in Argentina. Implications for public health

María Dolores Bargues, Roberto L. Mera y Sierra, Humberto Gustavo Gómez, Patricio Artigas, Santiago Mas-Coma

Departamento de Parasitología. Facultad de Farmacia. Universidad de Valencia. España. Facultad de Ciencias Médicas. Universidad Nacional de Cuyo. Argentina

 

RESUMEN
Objetivo: La Fascioliasis humana ha pasado recientemente a engrosar la lista de las grandes enfermedades parasitarias de la humanidad. Las zonas de endemia humana presentando mayores prevalencias e intensidades se encuentran en Países Andinos como Bolivia y Perú, donde la enfermedad está transmitida por el molusco gasterópodo de la familia Lymnaeidae Galba truncatula. El hallazgo y determinación de esta misma especie de vector en Argentina, en 2001, fueron inicialmente realizados con base morfológica, siendo así que estudios posteriores han demostrado que la morfología no basta para la distinción entre especies del grupo Galba/Fossaria. El presente trabajo tiene por finalidad la confirmación de la existencia, en Argentina, del mejor vector de Fascioliasis conocido mediante secuenciación de un marcador específico del ADN. Material y métodos: Los moluscos fueron recolectados en El Salto, en la zona andina de Mendoza, Argentina, y fijados en etanol al 70%. El ADN genómico fue extraído, amplificado y purificado siguiendo métodos estandarizados. La secuenciación del ITS-2 del ADN ribosomal nuclear fue obtenida mediante secuenciador automático utilizando cebadores específicos. El programa BLAST fue usado para comparación rápida con todas las secuencias de Lymnaeidos disponibles en el GenBank. El análisis comparado final se hizo mediante alineamiento utilizando Clustal W versión 1.8. Resultados: La secuencia completa del ITS-2 del ADNr resultó ser de una longitud de 401 pares de bases y un contenido en GC del 58,6%. La secuencia obtenida demostró ser idéntica en longitud, contenido y composición de nucleótidos que el haplotipo H3 de Galba truncatula, anteriormente descrito en Bolivia. Conclusiones: El hallazgo en Mendoza del mismo haplotipo de molusco vector responsable de la Fascioliasis humana y animal del Altiplano Norte Boliviano, la mayor zona de endemia humana conocida, constituye un hecho de un enorme potencial de impacto en salud pública dadas las connotaciones de gran capacidad de transmisión que confluyen en la zona andina de Mendoza. Todo indica la necesidad de efectuar un amplio estudio futuro con el fin de llegar a conocer la distribución geográfica de G. truncatula H3 en Argentina, para lo cual el ITS-2 se muestra como la herramienta molecular más útil, específica, sensible y práctica.

 

ABSTRACT
Objective: Human fascioliasis has recently entered in the list of the most important parasitic diseases of man. The human endemic areas presenting the highest prevalences and intensities are found in Andean countries as Bolivia and Peru, where the disease is transmitted by the molluscan gastropod of the Lymnaeidae family Galba truncatula. The finding and determination of this vector species in Argentina in 2001 were initially based on morphology. More recent studies have demonstrated that morphology does not enable to distinguish between species of the Galba/Fossaria group. The aim of this paper is to confirm the presence, in Argentina, of the best fascioliasis vector known by means of specific DNA marker sequencing. Material and methods: Molluscs were collected in El Salto, on the Andean zone of Mendoza, Argentina, and fixed with ethanol 70%. Total DNA was extracted, amplified and purified following standard methods. The sequence of the nuclear ribosomal DNA ITS-2 was obtained by means of an authomatic sequencer using specific primers. The BLAST programme was used for the fast comparison with all sequences of lymnaeids available at GenBank. The final comparison was made by alignment using Clustal W version 1.8. Results: The complete sequence of the rDNA ITS-2 showed a lenghth of 401 base pairs and a GC content of 58,6%. The sequence obtained was identical in length, contents and composition of nucleotides than the H3 haplotype of Galba truncatula, previously described in Bolivia. Conclusions: The finding in Mendoza of the same haplotype of the molluscan vector responsible of the human and animal fascioliasis on the Northern Bolivian Altiplano, the most important human endemic area, is a fact of great interest because of its large potential impact on public health, owing to the aspects of great transmission capacity which are present on the Andean zone of Mendoza. All suggests the need to perform a large future study to establish the geographical distribution of G. truncatula H3 in Argentina. The ITS-2 appears to be the most useful, specific, sensible and practical molecular tool for such future studies.